【導(dǎo)讀】我們在購買中藥對照品的時候,為了驗證中藥對照品的可靠性以及質(zhì)量,對其化學(xué)結(jié)構(gòu)的鑒定是必不可少的,通常采用的方法有:物理常數(shù)的測定和元素分析、光譜分析。本文將為你帶來這幾種對照品結(jié)構(gòu)鑒定的方法。
一、物理常數(shù)的測定和元素分析
物質(zhì)的物理常數(shù)是表明該物質(zhì)性質(zhì)的重要依據(jù),在中藥對照品的鑒定工作中經(jīng)常測定的重要物理參數(shù)有:熔點、沸點、旋光度等。其測定方法詳見《中國藥典》1997年版附錄。
元素分析是化合物結(jié)構(gòu)測定中常用的方法之一。所用樣品最通常為幾個毫克,通過元素分析,可以獲得化合物中碳、氛、氧、氨和硫等幾種元素各自的比例;如果能提供的樣品有足夠多的量(幾十毫克)時,還可以測定出某些金屬元素在化合物中所占的比例,如鈉等。結(jié)合分子展的測定結(jié)果,可推定出化合物的分子式。值得一提的是,供元素分析的樣品在測試前必須進行適當(dāng)處理,以保證樣品有足夠的純度。如果供試品的純度不夠,則測定出的結(jié)果是沒有意義的。
二、光譜分析
光譜分析是用于研究化合物結(jié)構(gòu)的重要手段、結(jié)合從各種光譜中獲得的相互補充的信息,可以對大量未知結(jié)構(gòu)的有機化合物進行解析,還可用核對光譜數(shù)據(jù)的方法對已知化合物進行鑒定。常用的波譜技術(shù)有四譜(紅外光諸、紫外光譜、核磁共振譜和質(zhì)譜)以及近年來逐步走向常規(guī)的晶體X-射線行射技術(shù)。
(一)紅外光譜法
利用紅外光譜對中藥化學(xué)對照品的結(jié)構(gòu)進行解析的時候,由于被測化合物結(jié)構(gòu)有一定的范圍,所以可以采用查對(與已知物的標(biāo)準(zhǔn)圖譜進行比較)的方法對被測物的紅外光譜進行分析。但是對于新化合物或無標(biāo)準(zhǔn)光譜的化合物,單憑紅外光譜難以完成結(jié)構(gòu)解析工作,必須進行綜合波譜解析。
為方便起見,常將紅外光譜劃分為特征區(qū)和指紋區(qū)兩個區(qū)城。紅外光譜的解析通常遵循先特征區(qū)后指紋區(qū)的順序。特征區(qū)可以提供有關(guān)化合物基本類型,如確定化合物為芳香族、脂肪族或不飽和化合物,以及化合物所具官能團的信息。如中藥對照品中貝母素甲和貝母素乙,它們在結(jié)構(gòu)上的區(qū)別在于Cn位連接的取代基不同,前者為羥基,后者為前者的氧化產(chǎn)物。從紅外光譜上可以看出貝母素甲在3350cm'的羥基吸收峰較貝母素乙的吸收峰要強得多,而貝母素乙在1700em-'附近有很強的炭基吸收峰,貝母素甲則無此特征。由此可以很方便地將兩者區(qū)別開,指紋區(qū)有許多特征區(qū)吸收峰的相關(guān)峰,可以作為確定化合物類型和所具官能團的旁證。此外,還可以用來確定化合物的組微結(jié)構(gòu),如苯環(huán)的取代位置、幾何異構(gòu)體的判斷等等。
(二)紫外光譜法
紫外光譜在中藥對照品結(jié)構(gòu)測定中起的主要作用是對具有紫外吸收的已知化合物進行定性。對未知物的結(jié)構(gòu)測定中用推測官能團、說明結(jié)構(gòu)中的共軛體系并由此推測共軛體系中取代基的位置、數(shù)目與種類,如:酮式與醇式的判斷、順反并構(gòu)體的判定、黃酮化合物結(jié)構(gòu)類型推定,并可加入診斷試劑,通過診斷位移值判定黃酮化合物取代菇的種類和位置。
由于紫外光譜的測定方法最為簡單,所用樣品量極少,測定價格做為便宜,所以在中藥化學(xué)對照品的鑒定工作中首先采取核對紫外光譜的方法。如果對照品的紫外光譜與標(biāo)準(zhǔn)圖譜不一致,則證明其結(jié)構(gòu)或純度不符合要求,如中藥對照品中的補骨脂素和異補骨脂素,它們都是較大的共軛體系,互為同分異構(gòu)體,前者為線型香豆素,后者為角型香豆素。對比兩者的紫外光譜可以發(fā)現(xiàn),補骨脂素在319nm處有一弱吸收峰, 但異補骨脂素卻無此吸收,由此可以對兩者加以區(qū)別。但是紫外光譜的吸收是基于分子結(jié)構(gòu)中的生色團和助色團的特性,所以單獨依靠紫外光譜不能確定化合物的分子結(jié)構(gòu)。